В ЦДТИ проведена дехорионизация личинок zebrafish

 

В Центре доклинических и трансляционных исследований – новой исследовательской площадке Института экспериментальной медицины – уже полным ходом идет работа. Cотрудниками проведена дехорионизация личинок zebrafish Daniorerio механическим путем.

Для оценки токсичности вещества или лекарственного препарата существует протокол OECD FET (fishembriotoxicity) test. Опыт продолжается в течение 96 часов. Эмбрионы Daniorerio находятся в водной среде с добавлением различных доз вещества. Сотрудники Центра каждые 24 часа оценивают смертность, задержку развития, признаки дисэмбриогенеза у экспериментальных моделей.

При изучении веществ с большой молекулярной массой более 30 кДа требуется удаление хориона, поскольку вещество либо не проникает к эмбриону, давая ложноотрицательный результат, либо вызывает закупорку пор хориона, соответственно, давая ложноположительный результат. Удаление хориона осуществляется в первые сутки. Существуют два метода: химический, с помощью фермента проназы, и механический.

В настоящее время идет отработка механической дехорионизации. С помощью микрохирургических анатомических пинцетов сотрудники осуществляют надрыв хориона и лёгкими касательными движениями извлекают эмбрион, что требует очень большой аккуратности.

На изображениях видна отработка методики дехорионизации на самых ранних стадиях развития эмбрионов Daniorerio. На видео видны сердцебиение и движение плавников — эти критерии также могут учитываться при оценке токсического воздействия препарата.

16 клеточная стадия ZF дехорионизированный эмбрион 16 клеточная стадия ZF